微生物知識點(36)(第1/2 頁)
第四節 病毒的血清學檢測
許多血清學技術可用於病毒及其相應抗體的檢測
如:
1中和試驗(最常用,新分離病毒,判斷血清型)
2免疫染色技術
3免疫沉澱技術
4免疫轉印技術
5酶聯免疫吸附試驗(ELISA)等
病毒中和試驗:
1針對病毒的一些蛋白質抗原或抗原表位的抗體與病毒結合後可以中和病毒的感染性。
2中和試驗具有很強的特異性,是檢測病毒和新分離病毒毒株的鑑定最經典的方法,也可用於檢測病毒感染動物血清中的抗體。
血凝抑制試驗(特異性):
1具有血凝活性病毒的抗體可阻斷病毒與紅細胞的結合。
2利用血凝抑制試驗可檢測和鑑定具有血凝特性的病毒。
3將特異性抗體與病毒作用,然後觀察血凝抑制現象。
4該法敏感、簡單、費用低、操作簡便也用於檢測動物血清中血凝抑制抗體。
病毒蛋白的檢測:
1病毒抗體可用於檢測感染細胞或組織中的病毒蛋白。
2採用免疫染色技術如免疫熒光抗體技術、免疫酶染色技術,有直接免疫染色和間接免疫染色兩種方法。
酶聯免疫吸附試驗(ELISA)(臨床實驗應用最廣泛)
1酶聯免疫吸附試驗可用於樣本中病毒檢測和動物血清中病毒特異性抗體的檢測。
2檢測病毒抗原可採用夾心法和雙夾心法。
3檢測抗體可採用間接法。
病毒核酸的檢測
病毒核酸檢測是指利用一些分子生物學技術檢測病毒核酸而確證樣本中病毒的存在
1基因組電泳分析
2核酸雜交
3聚合酶鏈式反應(pcR)
4酶切圖譜分析
5dNA 晶片技術等
病毒的鑑定依據:
病毒的初步鑑定依據:
(1)動物感染範圍及潛伏期
(2)對雞胚的敏感性、細胞形態變化型別
(3)病毒干擾現象、血凝性質、紅細胞吸附。
(4)理化性質:
1病毒核酸型別測定
2病毒大小形態
3病毒對乙醚敏感試驗
4病毒耐酸試驗
病毒的最後鑑定依據:
主要是血清學方法和分子生物學方法
血清學方法:
1中和試驗
2補體結合試驗
3血凝抑制試驗等
補充
·元體、始體和包涵體的比較
元體
形態:個體形態
大小:小而緻密
細胞壁:有
發育階段:無繁殖能力的成熟衣原體
感染:高度傳染性
染色:姬姆薩 紫 馬基維洛 紅
始體
形態:個體形態
大小:大而疏鬆
細胞壁:無
發育階段:二等分裂繁殖
感染:無感染性
染色:姬姆薩 藍 馬基維洛 藍
包涵體
形態:集團形態
發育階段:子代元體和裂殖的始體
染色:姬姆薩 深紫 G?
大腸桿菌
(1)形態及染色特性
1G- 菌無芽孢的直杆菌,大小 0.4—0.7x2—3um,兩端鈍圓,